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HindIII限制性内切酶图片
产品货号:
GS2098
中文名称:
HindIII限制性内切酶
英文名称:
HindIII
产品规格:
2000U
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
HindIII限制性内切酶识别5'-AAGCTT-3'的酶切位点,并在1×Buffer W中具有最佳活性。


5'-AA G C T T-3'
3'-T T C G AA-5'



HindIII限制性内切酶由携带自流感嗜血杆菌的hindIIIR克隆基因的重组大肠杆菌表达而来。


1U酶是指在1h,37℃,总反应体积为50μL时水解1μg λDNA所需的酶。


组分规格
HindIII限制性内切酶(10U/μL)200μL
10×Buffer W1mL

保存:-20℃


10mM Tris-HCl(pH7.5),250mM KCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,0.2mg/mL BSA,50%甘油。


10×Buffer W:
100mM Tris-HCl(pH8.5),100mM MgCl2,1000mM KCl,1mg/mL BSA。


1×Buffer W,37℃温育。


在80℃加热20min失去活性。


  • 过量酶切测定:100U Hind III与1μg λDNA孵育16h后,未检测出非特异性活性。
  • 连接/重切测定:使用10倍酶量消化底物,回收酶切产物。在22℃下使用适量T4 DNA连接酶可以将超过90%的酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开超过95%的连接产物。
  • 蓝/白斑克隆测定:将pUC57用10U酶在特殊位点进行16h的酶切。重组和转化后,检测到0.1%的白色菌落。



  • HindIII限制性内切酶对dam、dcm、CpG甲基化均不敏感。
  • 高酶浓度和非最佳缓冲液的使用可能导致星活性。
  • 为了获得更高的活性,应将BSA加入到1X反应混合物中至最终浓度为100μg/mL,使用BSA时不要长时间孵育。



DNA中识别位点数:
λ DNAφX174pUC119pBR322Col E1Ad2
7011012
pUC18SV40pUC57pUC19pTZ19R/UM13mp18/19
161111

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